La hemólisis es un efecto preanalítico evitable en la mayoría de los casos. Su aparición se debe a la técnica de extracción empleada y a las condiciones de transporte y preparación de las muestras. Su presencia produce error en muchas determinaciones habituales en química clínica, en muchos casos por la mezcla del contenido intraeritrocitario y en algún caso por el efecto interferente de componentes de los hematíes, como la hemoglobina.

La hemólisis junto a la ictericia y la lipemia se denominan habitualmente interferencias endógenas, en tanto que se trata de constituyentes que aparecen de forma natural en la sangre, pero su elevación excesiva puede alterar la exactitud de la determinación de otro constituyente.

Terminológicamente, la hemólisis no es una interferencia, sino un efecto preanalítico, definido como los cambios que se producen en la concentración de uno o más constituyentes biológicos, debido a factores preanalíticos como la forma de obtención o las condiciones patológicas del paciente en el momento de la obtención.

Cabe distinguir las situaciones en que la hemólisis es un componente de variabilidad biológica no controlable, cuando se debe a un proceso patológico en el paciente, de las ocasiones en que es un componente controlable, producido a consecuencia de la técnica de obtención. El 97% de los casos se debe a obtención incorrecta (controlable) y el 3% a causas in vivo (no controlable).

QUE TENER EN CUENTA A LA HORA DE LA EXTRACCIÓN PARA EVITAR LA HEMOLISIS :

• El calibre del dispositivo de extracción: el grado de hemólisis es inversamente proporcional al diámetro del catéter o aguja ya que se produce un aumento el flujo y la fricción causante de la hemólisis. No se aconsejan agujas de bajo calibre. Canino 20/22G Felino 22/25G.
• Lugar de punción: Siempre elegir venas cefálica, safena o femoral, en animales menores de 5 kg y felinos extraer de vena yugular siempre es una buena opción, sobre todo si hay que sacar mucho volumen de muestra.
• Antiséptico: el alcohol utilizado en la desinfección de la zona antes de la punción puede provocar hemólisis, se debe esperar a que se evapore.
• Evitar cambios bruscos de temperatura, y nunca agitar las muestras, invertir los tubos si es necesario homogeinización.

El fenobarbital es la droga antiepiléptica más usada en perros y gatos. Es usada para el tratamiento de la epilepsia idiopática, convulsiones cuya causa no puede ser completamente determinada, y es efectiva en pacientes con epilepsia sintomática o presunta epilepsia. Como único medicamento, puede controlar las convulsiones en un 60% a 80% de perros y gatos epilépticos.

RIESGOS
Aunque el medicamento es generalmente bien tolerado, los efectos secundarios pueden incluir sedación ligera durante las primeras 2 semanas de terapia, poliuria y polidipsia y aumento de peso. La supresión de la médula ósea que resulta en pancitopenia es una reacción idiosincrática muy rara que se resuelve con la suspensión del uso del medicamento. En los gatos, el prurito facial, edema límbico, y discrasias en sangre pueden ocurrir rara vez y resolverse con la suspensión del uso de fenobarbital.

La hepatotoxicidad es el efecto secundario potencial más serio a consecuencia del uso de fenobarbital en perros (no en gatos) y esto resulta en una elevación significativa de las enzimas hepáticas y puede derivar en inflamación crónica, cirrosis o síndromes hepatocutáneos.
El riesgo de hepatotoxicidad disminuye a medida que el clínico está más informado de los mismos y monitorea al animal periódicamente haciendo dosajes de fenobarbital en sangre y chequeando los niveles de concentración de enzimas hepáticas en sangre.

MONITOREO
El monitoreo de pacientes en terapia con fenobarbital es importante para:

• Optimizar la dosis.
• Minimizar los efectos secundarios.
• Evitar la hepatotoxicidad.
• La toma de muestra para la evaluación de los niveles de fenobarbital sérico debe iniciarse de 2 a 4 semanas luego de empezada la terapia y cada 6 a 12 meses en adelante.

La neutrofilia fisiológica se desarrolla rápidamente en la sangre tras la liberación de epinefrina como ocurre con el ejercicio, miedo o excitación, el recuento celular no aumenta más del doble del valor normal y NO hay desvío a la izquierda. (En equinos y felinos pueden mostrar una linfocitosis acompañante).

El leucograma vuelve a la normalidad después de 30 minutos de la eliminación del estimulo.

La netrofilia por estrés, se da por liberación endógena o la administración exógena de glucocorticoides. El número absoluto de neutrófilos no aumenta más de 2 veces el valor normal y NO hay desviación a la izquierda. Se acompaña de una linfopenia y eosinopenia.

Neutrofilia con desvío a la izquierda se asocia con alteraciones inflamatorias. Estas pueden ser infecciosas ( bacterianas, víricas, fúngicas, protozoarias) o no infecciosas (inmunomediadas). La presencia de una desviación a la izquierda significativa indica que el estímulo para la liberación de neutrófilos de la médula ósea es mayor del que puede acomodarse por la liberación de las reservas de neutrófilos maduros.

La neutropenia puede desarrollarse por una reducción de la liberación de neutrófilos en la médula ósea, incremento de su migración a los tejidos, destrucción en la sangre o una desviación de los neutrófilos del compartimento de neutrófilos circulantes al compartimento marginal de neutrófilos.

La reducción de neutrófilos de la médula ósea puede ser resultado de un número reducido de células progenitoras. Por ejemplo en leucemias mieloides agudas, síndromes mielodisplásicos, infecciones por el virus de Vif-Vilef o de una maduración anormal de las células precursoras de los neutrófilos que puede aparecer cuando existe una hipoplasia medular generalizada o una hipoplasia selectiva de neutrófilos.

Las alteraciones hipoplásicas asociadas con un número reducido de células precursoras de los neutrófilos en médula ósea incluyen :

• Reacciones fármaco idiosincrásicas por ej reacciones a trimetoprim/sulfas, griseofulvina y cefalosporinas.
• Toxicidad por estrógenos (exógenos o endógenos)
• Fármacos quimioterápicos citotóxicos
• Enfermedades víricas por ej parvovirus
• Mieloptísis, cuando hay un reemplazo de células hematopoyéticas normales por células anormales por ej leucemias linfoides, o metástasis de linfomas, carcinomas o mastocitomas.

La neutropenia puede desarrollarse en situaciones de inflamación aguda en la que la demanda de neutrófilos reduce las reservas de la médula ósea y no ha transcurrido tiempo suficiente para aumentar la granulopoyesis, por ejemplo en septicemias o endotoxemias. En estas alteraciones es frecuente que exista una desviación a la izquierda degenerativa.

La migración de neutrófilos desde la sangre a los tejidos es un proceso unidireccional (no hay retorno a la circulación). En estados no patológicos tiene lugar fundamentalmente hacia el aparato digestivo, respiratorio y urinario.

En perros el número de neutrófilos del pool circulante y marginal es casi igual, mientras que en gatos el marginal es 2-3 veces el tamaño del circulante.

Ante un estado patológico, la vida media de los neutrófilos circulantes se acorta debido a la mayor migración celular en respuesta a gradientes de moléculas quimiotácticas generadas en el foco inflamatorio; es por ello por lo que podemos encontrar gran variabilidad en los resultados del leucograma en periodos cortos de tiempo.

Cambios del leucograma en respuesta a la enfermedad inflamatoria:

1. Inicialmente se produce la liberación de neutrófilos segmentados desde el pool de almacenamiento de la médula ósea, lo que origina neutrofilia madura.

2. La neutrofilia se acompaña de desviación a la izquierda cuando el pool de almacenamiento medular se agota y se liberan neutrófilos en una tasa superior a la capacidad de la médula ósea para producir PMN’s segmentados. Se liberan por tanto, neutrófilos del pool de maduración (principalmente en bandas o cayados y metamielocitos) e incluso del pool mitótico (mielocitos y promielocitos) en función de la intensidad de la inflamación.

Se considera desviación a la izquierda cuando el nº de neutrófilos no segmentados o inmaduros es >300/ml.

Las desviaciones a la izquierda discretas (300-1000/ml) se asocian con procesos leves o con inflamaciones que tienden a la cronicidad y con predominio, dentro de las células inmaduras,de neutrófilos en banda o cayados.

Las desviaciones a la izquierda moderadas (>1.000/ml) se asocian con procesos agudos generalmente localizados

Recuentos inferiores a 40.000 leucocitos/ml (perros) o 30.000 leucocitos/ml (gatos) asociados a una desviación la izquierda leve a moderada, es una respuesta correcta de la médula ósea hacia el proceso inflamatorio Pronóstico favorable.

La presencia de neutrófilos más inmaduros que los bandas (metamielocitos,mielocitos…), indica mayor demanda celular del foco inflamatorio y da idea de la intensidad
y gravedad del mismo.

Se refiere a la variación en los diámetros de los eritrocitos en frotis de sangre teñidos. Esta se incrementa cuando existen diferentes poblaciones de células, por ejemplo en anemias regenerativas cuando se forman abundantes reticulocitos se observa un número elevado de células más grandes de lo normal.

Policromasia

Es ante la presencia de eritrocitos de color rojo azulado en los frotis sanguíneos teñidos, los eritrocitos policromatofílicos son reticulocitos que se tiñen de color rojo azulado debido a la presencia combinada de hemoglobina y ribosomas. La presencia de un incremento de la policromasia en animales anémicos indica que existe un porcentaje incrementado de reticulocitos.

Hipocromasia

La presencia de eritrocitos con una reducción de la concentración de hemoglobina e incremento de la palidez central se denomina hipocromasia.